Obsah
Chromatografie je široce používána v chemických laboratořích k určení identity neznámé složky. Tato složka protéká obalovým materiálem kolony a interaguje s částicemi. Interakce mezi částicemi a složkami ve vzorku jsou založeny na přitažlivosti nebo rozpustnosti mezi nimi. Molekuly, které nemají žádnou interakci s částicemi materiálu pláště, se mohou bez překážek procházet. Čas potřebný k tomu, aby molekuly prošly z místa vstřikování do systému na maximálním píku nereaktivní molekuly, je mrtvá doba kolony.
Krok 1
Posilte neznámý vzorek malým množstvím sloučeniny, která není zadržena materiálem kolony. Sloučenina projde kolonou bez interakce s obalovým materiálem ve koloně.
Krok 2
Naplňte stříkačku přibližně 20 mikrolitry vzorku a jehlu stříkačky zasuňte do injekčního portu. Naplňte smyčku vzorku z ventilu vyprázdněním injekční stříkačky do ventilu.
Krok 3
Zapněte chromatografický přístroj a spusťte mobilní fázi. Tato fáze protéká přístrojem a odebere vzorek přes kolonu a detektor, který končí v odpadní nádobě.
Krok 4
Aktivujte ventil, který umožní vzorku vstoupit do cesty toku tekutiny. Tím se načtou komponenty vzorku do horní části sloupce a začne se separace.
Krok 5
Sledujte signál vysílače detektoru a identifikujte první vrchol v chromatografu. Rozdíl mezi dobou injektáže a maximem prvního píku, představovaným výztužnou složkou, je mrtvý čas.
Krok 6
Změřte vzdálenost mezi bodem injekce a maximální výškou prvního píku. Vynásobte vzdálenost rychlostí papíru nebo osy, abyste našli mrtvý čas.