Obsah
- Příprava bramborového extraktu
- Krok 1
- Krok 2
- Krok 3
- Příprava směsi
- Krok 1
- Krok 2
- Krok 3
- Krok 4
- Sterilizace
- Krok 1
- Krok 2
- Krok 3
- Krok 4
- Krok 5
- Nalití směsi
- Krok 1
- Krok 2
- Krok 3
- Krok 4
- Krok 5
Bramborový dextrózový agar (BDA) je dobré polotuhé médium pro všeobecné použití používané k výrobě hub. Často se také používá k izolaci, pěstování a udržování rostoucích druhů hub. Lze zakoupit hotové Petriho misky nebo zkumavky obsahující BDA nebo lze BDA rychle připravit pomocí komerční premixu. Není však těžké vytvořit jednoduchou a efektivní verzi za nízkou cenu.
Příprava bramborového extraktu
Krok 1
Brambory vložte do hrnce s asi 1,2 litru vody z vodovodu a vařte na sporáku hodinu.
Krok 2
Sejměte pánev z ohně a nechte kapalinu vychladnout, dokud s ní nebude možné pohodlně manipulovat (asi deset minut).
Krok 3
Nalijte tekutý bramborový extrakt přes filtr nebo gázu a shromážděte jej do jiné nádoby.
Příprava směsi
Krok 1
Přidejte dextrózu a agar do jednoho litru vody z bramborového extraktu.
Krok 2
Vyzkoušejte pH roztoku papírem pro testování pH nebo pH metrem.
Krok 3
Pokud je pH vyšší než 6,5, snižte jej přidáním jedné kapky roztoku kyseliny chlorovodíkové po jedné a opakujte zkoušku.
Krok 4
Pokud je hodnota pH nižší než 6, upravte ji přidáním jedné kapky roztoku hydroxidu sodného najednou a opakujte zkoušku.
Sterilizace
Krok 1
Dobře promíchejte a rozdělte na menší dávky po 250 mililitrech. Nalijte do čtyř 500 ml lahviček (každá láhev by měla být do poloviny plná, aby nedošlo k varu).
Krok 2
Zakryjte každou injekční lahvičku kusem hliníkového papíru složeného volně, aby film nespadl, ale aby také nebyl zcela utěsněn.
Krok 3
Lahvičky vložte do tlakového hrnce.
Krok 4
Provozujte tlakový hrnec podle pokynů výrobce a sterilizujte BDA při 121 ° C při tlaku 103,421 Pa (15 psi) po dobu 15 minut.
Krok 5
Vypněte tlakový hrnec a nechejte jej vrátit se na atmosférický tlak, poté lahvičky vyjměte a nechejte vychladnout, dokud s nimi nebude možné zacházet.
Nalití směsi
Krok 1
Vyrovnejte Petriho misky na rovný povrch.
Krok 2
Jakmile byly lahvičky zchlazeny na manipulační teplotu, ale než médium začne tuhnout, držte lahvičku v jedné ruce a druhou rukou sejměte fóliové víčko.
Krok 3
U každé Petriho misky sejměte víko jednou rukou, rychle ho do poloviny naplňte tekutým BDA a víčko nasaďte zpět.
Krok 4
Opakujte výše uvedený krok 3, dokud nebudou naplněny všechny Petriho misky.
Krok 5
Pokud v ADF zbývá nějaký zbytek, vyjměte láhev s originálním víkem, nechte ji vychladnout a ztuhnout, hliníkové víčko utáhněte a uložte do chladničky.