Obsah
- Pokyny
- Příprava materiálů
- Umístění spór na talíře
- Izolace čisté kultury
- Příprava potomků
- Inokulace substrátu pro růst hub
- Jak
- Oznámení
- Co potřebujete
Houby mohou být pěstovány ze spór nebo tkáňové kultury. Kultury spór vedou k populacím geneticky odlišných hub. Je užitečný při izolaci a testování nových kmenů. Postupy pro rozvoj hub jsou druhově specifické. Předpokládá se, že výrobce ví, jak pěstovat houbičku, která je předmětem zájmu, zejména poté, co bylo získáno dost potomků.
Pokyny
Sbírka hub Agaricus (Fotky Iana Granta, Jasona Hollingera)-
Připravte 500 až 1000 ml MEA podle pokynů výrobce.
-
Roztok chloridu sodného se umístí do zkumavek a MEA do Erlenmeyerovy baňky. Trubky a lahvičky nenaplňujte více než do poloviny a mírně zakryjte.
-
Roztok chloridu sodného, MEA a Petriho misek (pokud nejsou sterilní) sterilizujte v tlakovém hrnci při 121 ° C a 1 atm po dobu 15 až 20 minut.
-
MEA, roztok chloridu sodného a Petriho misky se odstraní z tlakového hrnce a nechá se vychladnout.
-
Když MEA dostatečně vychladla, aby se s ní mohlo manipulovat, ale před tuhnutím, opatrně zvedněte víčko z každé Petriho misky a nalijte 10 až 20 ml roztaveného MEA.
-
MEA a chlorid sodný se nechají ochladit na teplotu místnosti.
Příprava materiálů
-
Háček sterilizujte v alkoholové lampě. Nechte drát ohřát, dokud se neobarví červeně, pak nechte vychladnout po dobu 5 sekund.
-
Ponořte háček do roztoku chloridu sodného, aby se zachytila kapka tekutiny. Šíření kapky na malé ploše v dojem spór (nebo jiný zdroj spór) vytvořit kapalina / směs spór. Opakujte tento postup několikrát, sterilizujte háček mezi každým z nich.
-
Ponořte háček do suspenze chloridu sodného a spór, abyste shromáždili spory.
-
Zvedněte víko agarové desky tak, aby byl přístup k háčku přístupný.
-
Nasaďte suspenzi spór z háčku na povrch agaru a desku znovu vezměte. Opakujte tolik karet, kolik chcete (nejméně pět nebo šest).
-
Destičky s agarem uzavřete plastovým obalem, aby nedošlo k vysušení. Spory se inkubují za vhodné teploty a světelných podmínek pro daný druh.
-
Sledujte příznaky každých pár dní a hledejte známky klíčení. Bílý načechraný růst (mycelium) na povrchu agaru indikuje přítomnost houby (ale nemusí to být houba, která vyrostla ze spór).
Pěstování hub ze spór
Umístění spór na talíře
-
Porovnejte mycelium s publikovanými popisy mycelia, které se snažíte růst.
-
Pokud mycelium vypadá očekávaným způsobem, očistěte kulturu vyříznutím kusů a přenesením na čerstvé agarové plotny.
-
Pokračujte v řezání kusů ze špičky rozpínajících se kolonií, dokud čistá kolonie neobsahuje bakterie.
Izolace čisté kultury
-
Řezané a převedené kusy vyčištěného mycelia na sterilizovaná skleněná vlákna nebo substrát ze štěpky. Druh použitého substrátu závisí na druhu houby.
-
Hlavní mycelia se inkubuje za podmínek vhodných pro daný druh až do úplného kolonizace substrátu mycelií.
-
Pravidelně protřepávejte nádoby mycelia, aby se fragment rozdrtil a kolonizace se urychlila.
-
Použijte hlavní mycelii k naočkování jiných nádob a produkci více mycelia.
Příprava potomků
-
Kontejnery mycelia se silně protřepávají, aby se fragmenty roztříštily.
-
Umístěte mycelii do sáčků nebo podložek pro růst hub.
-
Opatrně promíchejte mycelium na substrátu, za míchání nebo míchání.
-
Postupujte podle publikovaných metod o tom, jak pěstovat mycelium a zahájit proces plodení druhů, které se kultivují.
Inokulace substrátu pro růst hub
Jak
- Při vylévání agaru nebo převedení inokula snižte kontaminaci rychle.
- Čas a úsilí lze ušetřit nákupem sterilních a předem připravených agarových destiček.
- MEA je dobrým obecným prostředkem pro pěstování hub, ale jiný druh média může být vhodnější v závislosti na druhu.
Oznámení
- Tlakové hrnce se mohou zahřát a způsobit zranění. Dodržujte pokyny výrobce k údržbě a obsluze.
- Sterilizované nádoby jsou horké a musí se s nimi manipulovat pomocí teplem odolných rukavic, aby se zabránilo popálení a rozlití.
- Víka nádoby nechte sterilizovat, aby se tlak během procesu ohřevu a chlazení vyrovnal.
- Všechny nádoby, které mají být sterilizovány, musí být vyrobeny z autoklávovatelného materiálu.
Co potřebujete
- Houbové spóry
- Agar ze sladového extraktu (MEA)
- Petriho misky (talíře)
- Substrát vhodný pro druhy
- Alkoholová lampa
- Inokulace Hook
- Roztok chloridu sodného (0,9% W / V)
- Tlakový hrnec
- Zkumavky
- Erlenmeyerovy baňky
- Plastová fólie
- Nádoby nebo sáčky pro výrobu mycelia