Obsah
- Bakteriální agarové plotny
- Plnicí agarové desky
- Skladování agarových destiček
- Obrácení agarových destiček během skladování
- Revize agarových destiček během inokulace a inkubace
Agarové desky používají vědci v buněčné a molekulární biologii k provádění výzkumných experimentů. Jedná se o plastové Petriho misky naplněné agarem ve směsi s živinami, které umožňují růst různých mikroorganismů, jako jsou bakterie E. coli. Oni jsou považováni za běžný spotřební materiál v laboratořích, protože oni jsou používáni rychle a obvykle dělají interně, ve velkých sériích, a pak uložený.
Bakteriální agarové plotny
Tyto plaky jsou obecně vyráběny vědeckými techniky zahrnujícími laboratorní agar do bakteriálního kultivačního média, jako je Luria-Bertani, SOC, Terrific nebo methylen blue eosin. Příprava agarového kultivačního média je doplněna dalšími faktory, které mohou být potřebné pro přežití bakterií nebo specifickým antibiotikem (např. Ampicilinem nebo kanamycinem), aby se zabránilo růstu nežádoucích bakterií.
Plnicí agarové desky
Agarové desky se připravují jednoduchým smísením kombinace živin a agaru s vyváženým roztokem fyziologického roztoku a jejich zahříváním, dokud se nerozpustí. Po mírném ochlazení se přidají doplňky citlivé na teplo. Tato směs se nalije, když je ještě teplá (a tudíž zkapalněná) na dně každé Petriho misky; nechá se uschnout a ztuhnout na povrchu, na kterém mohou být umístěny bakteriální suspenze. Po úplném vychladnutí destiček jsou destičky označeny a skladovány až do použití. Správné skladování agarových destiček je důležité, aby se zajistilo, že se kultivují správné bakterie a že nedochází k nežádoucí kontaminaci, což může rušit experimentální výsledky.
Skladování agarových destiček
Agarové destičky lze skladovat několika způsoby, podle toho, které doplňky obsahují. Jsou-li k dispozici lehké doplňky, destičky jsou uloženy ve tmě, zabaleny ve fólii nebo uchovávány ve světle odolném obalu. Destičky jsou vždy uchovávány v chladničce nebo v laboratorní chladničce při teplotě 4 ° C nebo 39,2 ° C. Chladírenský sklad může zabránit nebo minimalizovat růst nežádoucích biologických kontaminantů.
Obrácení agarových destiček během skladování
Nepoužité desky se při skladování vždy převrátí nebo otočí vzhůru nohama nad víčky. To se provádí proto, aby se zabránilo odpařování, pokud se plaky skladují po dlouhou dobu, což může ovlivnit růstovou účinnost bakterií, nebo umožnit množení nežádoucích organismů, jako jsou formy.
Revize agarových destiček během inokulace a inkubace
Jakmile byly plaky naplněny vlhkou suspenzí bakterií, měly by být před inkubací přes noc mírně odpařeny. Nicméně stále bude přítomno mírné množství vlhkosti. Pokud se plak během inkubace neinvertuje, bakterie se nebudou schopny řádně připojit k agaru, což jim buď brání v pěstování a tvoří kolonie vhodným způsobem, nebo podpoří růst nežádoucích mikroorganismů. Jakýkoli z těchto výsledků zruší experiment. Kromě toho jakákoliv kondenzace nebo vlhkost může způsobit bodování, což ztěžuje výběr a analýzu jednotlivých kolonií. Jakmile bakterie tvoří kolonie, plaky se také uchovávají vzhůru nohama, aby se udržely hladiny vlhkosti.