Obsah
Výhody a nevýhody světelného mikroskopu se týkají světla, zvětšení a rozlišení. Mikroskopy světla zvětšují viditelné světlo - což je zjevná výhoda, protože to vidí naše oči. Zvětšení (jak velký objekt se objeví) a rozlišení (jasnost detailů) jsou však při použití světelných mikroskopů omezeny.
Vzorek na platformě světelného mikroskopu. (Snímek mikroskopu pomocí e-pyton z Fotolia.com)
Zdroj světla
Světelné mikroskopy buď používají zrcadlové zrcadlo nebo elektrické světlo pro přímé osvětlení skrz vzorek a do systému čoček. Zrcadlové systémy jsou levnější, ale vyžadují odpovídající osvětlení prostředí a více trpělivosti. Elektrické světelné systémy jsou dražší a vyžadují blízkost, ale jejich použití je jednodušší.
Základní světelný mikroskop se zrcadlovým světelným zdrojem. (obraz mikroskopu Aleksej Kostin z Fotolia.com)Intenzita světla
Intenzita světla (jas) je důležitá, když světlo prochází vzorkem, který vidíte. Jemný, průsvitný (světlý) vzorek se nejlépe pozoruje při světle s nízkou intenzitou, zatímco tlustší neprůhledné vzorky vyžadují světlo s vyšší intenzitou. Nevýhodou světelného mikroskopu je to, že některé vzorky jsou příliš tlusté nebo neprůhledné, aby mohly být pozorovány takovým mikroskopem. Velmi tenké nebo průsvitné vzorky mohou být zbarveny pro zvýšení kontrastu pro lepší sledování. Tento proces však zabije živé exempláře.
Nastavení intenzity světla
Membrána, umístěná nad zdrojem světla a pod deskou (plošina vzorku), upravuje množství světla procházejícího vzorkem. K dispozici jsou dva typy membrán: volič s pevnou clonou a nastavitelný styl clony.
Sestava s pevným otvorem se skládá z několika různých velikostí otvorů na otočné desce. Otáčením voliče se volí požadovaná clona. Pevné clonové clony jsou levnější, ale nabízejí méně přesné řízení intenzity světla.
Nastavitelná clonová clona poskytuje plynule proměnnou velikost clony, stejně jako f-stop na objektivu fotoaparátu, a poskytuje tak přesnější kontrolu nad intenzitou světla. Tyto systémy jsou dražší.
Volič s pevnou clonou clony je viditelný pod stolem tohoto mikroskopu. (Mikroskop image by Tribalstar z Fotolia.com)Zvětšení
Větší není vždy lepší. Světelné mikroskopy mohou velmi dobře zvětšit objekty až 1000x (tisíckrát větší než životnost). Kromě toho se obraz stále více zkresluje a rozmazává. Zvýšení velikosti neznamená lepší obraz a ve skutečnosti je obraz nepoužitelný.
Při zvětšení až 1000x lze vidět všechny druhy živých organismů až po nejmenší bakteriální buňky. Díky tomu je světelná mikroskopie mocným nástrojem pro studium buněčných typů, vody v rybnících, půdních vzorků a dalších studií, kde je žádoucí přehled mikroorganismů. Světelná mikroskopie, nicméně, je stěží užitečný pro studium subcelulárních struktur, protože rozlišovacích limitů inherentních v použití světla.
Rozlišení
Rozlišení je měřítkem jasnosti detailů vytvořených v obraze. Obrazy s nízkým rozlišením jsou rozmazané nebo „rozmazané“. Snímky s vysokým rozlišením jsou ostré, jasné a podrobné. Největší nevýhodou světelných mikroskopů je limit rozlišení. Kromě 1000x zvětšení, světelné mikroskopy rychle ztrácejí schopnost jemně doladit malé detaily. To vyplývá z fyzikálních vlastností světla, nikoli z kvality nástroje. Pro lepší rozlišení detailů subcelulárních struktur by měly být použity další technologie, jako jsou elektronové mikroskopy.