Obsah
PCR je metoda, kterou vědci používají k tvorbě milionů kopií segmentu DNA. Polymerázy - typ proteinového enzymu - pomáhají vytvářet nové segmenty. Vědci často používají polymerázu Taq v PCR.
Historie
Taq polymeráza pochází z bakterie Thermus aquaticus, která žije v termálních vodách. Kary Mullis a Fred Faloona vyvinuli PCR v polovině 80. let s použitím původně polymerázy Escherichia coli, ale vědci brzy začali používat Taq v PCR, protože byla odolnější vůči vysokým teplotám.
Funkce
PCR zahrnuje kroky denaturace, annealing a replikace, obvykle opakované 20 až 30 krát. Denaturace odděluje dvojité vlákno DNA na izolované řetězce. V kroku žíhání se primery vážou na segmenty DNA, které mají být kopírovány. Taq polymeráza začíná pracovat na kroku replikace: polymeráza se sestavuje z každého jednotlivého řetězce DNA označeného primerem novým dvojitým vláknem.
Výhody
Vysoké teploty potřebné k denaturaci DNA zničily polymerázu E. coli původně používanou v PCR, což vyžaduje přidání dalšího enzymu do každého cyklu. Taq polymeráza vydrží tyto teploty, takže vědci nyní mohou provádět několik cyklů PCR automaticky.
Úvahy
Taq polymeráza má relativně vysokou chybovost zdvojení DNA. Jiné polymerázy stabilní při vysokých teplotách mají nižší chybovost, ale Taq je stále nejpoužívanější díky své spolehlivosti a univerzálnosti.